第二代IVF ICSI技术已发展为男性不育，是治疗男性无精子症的唯一选择。显微镜下体外受精-胚胎移植技术，又称ICSI，是由显微镜技术发展而来的显微镜受精技术，通过人工将单个精子直接注入一个卵细胞的细胞质中，培养出一个胚胎。
操作过程是通过玻璃试管将精子注入卵膜。这需要极其高超的技术和丰富的经验。因为每个卵子只需要一个精子，即使是极少量的精液也足够了。大多数情况下，无精子症的男性仍然可以有自己的孩子。我们向所有怀疑自己精子生育能力的人推荐ICSI治疗。
第二代试管婴儿ICSI的具体适应症如下:
严重少精子症、弱精子症和畸形精子症；
不可逆梗阻性无精子症；
生精功能障碍(不包括遗传缺陷)；
免疫性不孕；
体外受精失败；
精子顶体异常；
需要进行植入前胚胎遗传学检查。
ICSI详细流程:
1.用促排卵药物刺激卵巢，使多个卵泡同时成熟脱落。
2.取出促排卵后获得的卵子，等待受精。
3.处理精液以分离精子用于与卵子体外受精。
4.利用IMSI技术在高倍显微镜下选择精子进行单精子注射。
5.在实验室中使用ICSI技术使精子和卵子受精并结合成胚胎。
6.在实验室中培养胚胎，直到胚胎发育到适合植入的阶段。
7.将胚胎移植回子宫
8.移植后冷冻剩余的胚胎。
第一步，促进卵子排卵。
在月经的第二天或第三天，通过验血检查女性体内的性激素来评估卵巢功能，然后通过阴道超声观察这个月经周期产生的基底卵泡数量。为了使多个卵子同时成熟脱落，一般使用注射型促排卵药物。
第二步，拿鸡蛋。
取卵过程在静脉无痛全麻下经阴道超声引导，取卵针穿过阴道穹窿到达卵巢吸卵。整个过程中，患者处于无痛睡眠状态，医生在超声波的辅助下找到了卵子，取卵时间不超过半小时。用显微镜从取出的液体中挑出卵子，然后将卵子移入培养液中，等待与精子受精。
第三步，分离精子。
男性应禁欲三天，但不要超过七天，通过自慰取精液。取精时使用无菌杯进行试管婴儿。精液必须在取精后半小时内送到实验室进行精子分离。如果超过时间，精子和卵子之间的受精和结合能力就会降低。分离筛选后的精子在专用营养液中培养，增加其运动速度，提高其受精和结合能力。
精子的处理包括:采用密度梯度溶液连续梯度离心法收集沉淀的活精子，用于与卵子受精。
第四步，选择精子进行ICSI。
在卵细胞浆内精子注射之前，需要从处理过的精子中选择最有机会受精的精子注射到卵子中，通常使用IMSI或其他技术。
第五步，将单个精子注入卵细胞浆中进行受精。
对于精子数量和质量都低于标准的患者，如果将精子和卵子放在一起进行自体受精，存在精子和卵子无法结合的高风险。因此，应采用第二代IVF ICSI技术辅助受精，以获得更多的胚胎。选择最有可能受精的精子，用微针将一个精子注入一个卵子。
第六步，胚胎培养。
胚胎可以在温度适宜的胚胎培养箱中培养，使其从一个细胞依次分裂成两个、四个、八个细胞。这时可以选择胚胎回植子宫，也可以继续培养发育成囊胚。
第七步，胚胎移植。
胚胎移植手术和一般妇科检查差不多。病人不需要任何麻醉或催眠。除非少数患者过于紧张或焦虑，可以使用安眠药，有助于胚胎移植的顺利完成。胚胎移植就是用很细的胚胎移植管，把胚胎吸到管里，然后通过子宫颈把胚胎放在子宫内膜上。
移植时使用超声波辅助观察，有利于将胚胎放置在最合适的位置。因为每个女性的子宫内部结构不同，有超声辅助怀孕成功的几率比没有超声辅助的高。
第八步，胚胎冷冻。
胚胎冷冻技术是提高现代试管婴儿成功率的关键。随着胚胎冷冻技术的不断发展和完善，冷冻时间可长达多年，多年后移植冷冻胚胎的患者也有机会在不重新促排卵的情况下怀孕。如果移植冷冻胚胎，女性子宫内膜厚度与自然子宫内膜厚度相近，而新鲜胚胎由于促排卵药物的影响，可能存在子宫内膜过厚的问题，不适合胚胎着床。所以相比较而言，对于促排卵后有大量卵子的患者，冷冻胚胎移植的成功率可能高于新鲜胚胎移植。
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